Descripción de la técnica

Como unidad de servicio de proteómica, ponemos a su disposición la experiencia y los conocimientos técnicos y reglamentarios.

Nuestra estrategia de servicios de proteómica incluye lo siguiente: Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato sódico (SDS-PAGE) para separar y visualizar el contenido de proteínas en 1D y 2D. Nuestro Servicio ofrece la posibilidad de analizar proteomas de organismos eucarióticos y procarióticos empleando la técnica de electroforesis bidimensional, que permite la separación de proteínas en función de su punto isoeléctrico (pI) y su masa molecular.

La electroforesis bidimensional en geles de poliacrilamida (2D PAGE) es la herramienta más empleada para el análisis global y la separación de los componentes del proteoma. Dicha técnica permite la separación de cientos o miles de proteínas (“spots”) en un único gel, mostrando un patrón característico y reproducible.

Características del equipo

Unidad de isoelectroenfoque Protean i12 IEF cell (BIO-RAD), para la focalización isoeléctrica en tiras de 7,11 y 17 cm de diferentes rangos de pH, principalmente 3-10 no lineal, 3-10 lineal,7-9 lineal y 4-7 lineal.

Unidad de cámaras de electroforesis PROTEAN II xi Cell para correr geles de acrilamida de 7, 11 y 17 cm.

Áreas de aplicación

Industria de medicamentos biotecnológicos:

Pruebas de caracterización fisicoquímica para la determinación de biocomparabilidad de los medicamentos biotecnológico

• Pruebas de caracterización fisicoquímica para la determinación de biocomparabilidad de los medicamentos biotecnológicos.
• Determinación de punto isoeléctrico
• Determinación de masa molecular relativa a un estándar
• Determinación de isoformas
• Mapeo de puentes disulfuro

Industria agrícola:

Estudios de proteomica para la determinación de marcadores moleculares relacionados a productividad, mejoramiento de semillas y nuevas líneas a introducir, resistencia a plagas entre muchos otros.

Especificaciones de la muestra

Durante todo el proceso de obtención de proteínas para su posterior análisis por SDS-PAGE se debe extremar la limpieza del material usado (vidrio, plástico, etc., lavados con agua milli-Q, no autoclaveados). Es IMPRESCINDIBLE el uso de guantes (sin talco ni polvo) en todo momento para evitar contaminaciones.

Las muestras deberán ser entregadas en buffers adecuados para mantener la integridad molecular de las proteínas y en contenedores apropiados para su transporte y almacenamiento, así como etiquetados adecuadamente para su manejo e identificación.